Стерилизация субстрата и емкостей
ШАГ 5. День 2. Стерилизация зернового субстрата для псилоцибиновых грибов
На этом этапе у тебя уже есть готовый субстрат, банки и крышки с инокуляционным портом и дышащим фильтром. Теперь нужно осуществить стерилизацию зернового субстрата для будущих грибов.
Что такое стерилизация?
Стерилизация – это тепловая обработка, предназначенная для уничтожения всех микроорганизмов и спор. Осуществляется при температурах выше +100°С в течение определенного времени.
Для стерилизации субстрата понадобятся
- Готовый зерновой субстрат.
- Подготовленные банки и крышки с инокуляционным портом и фильтром.
- Вермикулит.
- Алюминиевая фольга.
- Скороварка, автоклав или мультиварка под давлением.
- Тканевая салфетка.
- Вода.
Подготовка к стерилизации субстрата
1️⃣ На дно каждой банки насыпь 1 столовую ложку сухого вермикулита (достаточно буквально, чтобы дно покрыло, много не надо). В случае, если в банках будет слишком много влаги, этот вермикулит поможет это скомпенсировать. Он впитает излишки влаги при перетряхивании.
2️⃣ Наполни банки приготовленным субстратом, но не более 2/3 или 3/4 банки. В дальнейшем тебе нужно будет перетряхивать содержимое банок не открывая их, поэтому если ты заполнишь банку до верха, то перетрусить зерно в полной банке уже не получится.
3️⃣ Плотно закрой наполненные банки с субстратом подготовленной крышкой с инокуляционным портом. Во время стерилизации, под влиянием температуры крышки на банках могут ослабиться. Это касается и металлических, и полипропиленовых крышек. Проследи, чтобы перед стерилизацией они были плотно закрыты.
4️⃣ Крышки банок плотно оберни фольгой, чтобы вода при стерилизации не просачивалась через пластырь на крышке банки.
Стерилизация субстрата в скороварке или мультиварке
1️⃣ Для стерилизации субстрата понадобится автоклав, мультиварка под давлением или скороварка.
Рекомендация Shroomok на AliExpress:
Скороварка - Высота 13-14.5 cм - диаметр 20-22 см - 4.0-5.0L - бюджетные варианты, на 3л - будет мало
Pressure,Kitchen Utensils Autoclave - 5 л - достаточный объем, хорошая сталь
Pressure, Kitchen Utensils Autoclave - 6 л
Pressure, Kitchen Utensils Autoclave - 7 л
Pressure, Kitchen Utensils Autoclave - 9 л
Multicooker - 5L - электрическая многофункциональная мультиварка
Multicooker Pressure Rice Cooker - 5L - электрическая многофункциональная мультиварка
Stainless Steel Heating Autoclave - High Pressure Sterilizer - 8L/18L/24L - профессиональные автоклавы
На дно чаши мультиварки под давлением (скороварки или автоклав) положи металическую сетку-подложку (обычно входит в комплект к скороварке) или тканевую салфетку (хлопковое полотенце). Таким образом, банки и дно не будут соприкасаться друг с другом. Особенно это относится к стеклянным банкам, чтобы они равномерно прогревались и не разбились в процессе стерилизации.
Если банка лопнет при стерилизации, то использовать ее в дальнейшем для инокуляции нельзя!
2️⃣ Залей воду в мультиварку (или скороварку) так, чтобы ее уровень доходил до половины банок, можно немного больше. Просто учти, что вода будет кипеть и если налить больше, то крышки будут заливаться водой, а нам этого допускать нельзя.
3️⃣ Выставь банки в мультиварку (скороварку/автоклав). Полипропилевые банки из-за своей легкости могут всплывать. Чтобы они не перевернулись их можно придавить сверху керамической тарелкой и закрыть крышку мультиварки (скороварки).
4️⃣ На мультиварке под давлением (скороварка/автоклав) выставляем программу с температурой +120°..140°С. Дальше она сама доведет давление для выхода на необходимую температуру и начнет отсчет времени после этого.
На автоклаве нужно выставить давление 15 ppi.
Время стерилизации зависит от вида зерновых в субстрате:
⏰ Пшеница, овёс, ячмень, рожь – 1 час 30 минут.
⏰ Просо, коричневый рис, субстрат на основе муки бурого риса – 1 час 20 минут.
⏰ Кукуруза обычная, кукуруза для попкорна, сорго – 2 часа.
🔴 Важно! Температура стерилизации должна быть выше +100°С! Так больше вероятность уничтожить все жизнеспособные клетки спор грибков, бактерий и их эндоспоры, которые еще живут в зерне.
Учти, что рекомендованная температура для полипропиленовых банок до +140°С. Стеклянные легко переживут +160°С и более.
5️⃣ Когда стерилизация завершится оставь субстрат остывать не открывай мультиварку (скороварку или автоклав) и не доставай банки сразу после завершения стерилизации.
- Во-первых, по неосторожности можно обжечься паром.
- Во-вторых, если сразу открыть мультиварку (а тем более скороварку, которая работает под давлением), то стеклянные банки могут лопнуть из-за разницы давления и температуры. А лопнувшим банкам прямая дорога в утиль или придется стерилизовать субстрат заново в новой банке.
- При перепаде температур образовывается излишний конденсат в банках с субстратом.
- При перепаде температур и давления в банку поступает внешний воздух, кишащий контаминантами. Давление в банках должно выравниваться медленно и постепенно, до полного остывания. В идеале рекомендуется открывать скороварку/мультиварку незадолго до инокуляции субстрата.
6️⃣ Когда достанешь стерильный субстрат из скороварки оставь его остыть до комнатной температуры. Фольгу НЕ снимай! Незначительный конденсат в банках на этом этапе — это нормально.
7️⃣ Затем можешь загружать следующую партию на стерилизацию и так со всеми банками с субстратом.
Можно ли стерилизовать субстрат в духовке или обычной кастрюле?
Можно, но не всегда это получается удачно, так как такая стерилизация способствует лишь частичной деконтаминации, а не уничтожению всех бактерий и их эндоспор, которые прекрасно могут пережить температуру кипения +100°С.
Такой вариант подходит для стерилизации вторичных субстратов (кокосовый субстрат). Для зернового субстрата нужны более высокие температуры стерилизации, чтобы справиться с контаминантами. Поэтому в большинстве случаев стерилизация без скороварки/мультиварки приводит к заражению субстрата и вся проделанная работа пойдет насмарку.
В скороварке/автоклаве или мультиварке под давлением вероятность избавиться от конкурентной микрофлоры в субстрате гораздо выше. Возникает вопрос, почему. И этот вопрос сугубо физический.
Дело в том, что при обычном атмосферном давлении вода закипает при +100°С. И даже если разогреть духовку до +500°С, то вода, которая содержится в субстрате, все равно будет кипеть при +100°С. Соответственно, температура в самом субстрате не поднимется выше +100°С. Выше станет только тогда, когда из cубстрата выкипит вся вода. Но потом он начнет гореть.
Скороварка (автоклав/мультиварка под давлением) создает давление выше атмосферного, при котором для кипения воды нужна более высокая температура. И потому скороварка дает +120°С и выше, что есть более эффективно для борьбы с микроорганизмами.
Но что делать, если в хозяйстве скороварки нет? А специально покупать ради нескольких кейков - достаточно дорогое удовольствие... Тогда можешь попробовать стерилизацию в духовке или в кастрюле.
Если стерилизовать в кастрюле, то такая "стерилизация" должна быть с закрытой крышкой кастрюли, длиться не менее 2 часов после закипания воды и делать ее нужно 2 раза (повторить спустя 24 часа после первой стерилизации). Такой подход называется дробной стерилизацией.
Если стерилизовать в духовке, то в банку с готовым субстратом нужно добавить дополнительно 2-3 чайных ложки воды, т.к. при стерилизации в духовке субстрат существенно подсыхает, что является основным минусом такого метода. Крышки банок обязательно оберни фольгой.
Разогрей духовку до +150°С. Когда духовка будет разогрета, выставь банки с субстратом. Лучше использовать не сплошной, а сетчатый противень. А банки ставить боком, чтобы дополнительная жидкость, которую мы влили имела бОльшую площадь для распределения по поверхности, но это не принципиально.
Стерилизуй банки 30 минут при +150°С. Затем поставь температуру духовки на +120°С и стерилизуй еще 1,5 часа - для мелкого зерна; еще 2 часа - для кукурузы.
Затем оставь банки остывать в духовке. Не доставай их сразу, чтобы при разнице температур в банку не всасывался холодный неочищенный воздух. Дождись, когда они остынут вместе с духовкой до комнатной температуры.
Напоминаем, что такой метод никогда не дает 100%-ной гарантии и есть вероятность бактериального заражения!
Полезные заметки
- Проследи, чтобы крышки на банках до и после стерилизации были плотно закрыты. Случается так, что металлические крышки ослабевают и их нужно подкрутить. Если крышка окажется вовсе открытой (такое чаще случается с полипропиленовыми), то такой субстрат придется либо выбрасывать, либо стерилизовать повторно.
- Готовый не стерилизованный субстрат в банках допускается хранить в холодильнике 1-2 дня. Конечно, лучше стерилизовать субстрат сразу пока он свежий. Так, за 12 часов (с учетом времени на остывание) нам удаётся стерилизовать около 6 литров готового субстрата.
- Некоторые гроверы после остывания банок всегда стерилизуют их повторно (дробная стерилизация). Если ты новичок и есть сомнения, то можешь повторить процедуру и стерилизовать банки 2 раза с перерывом 12-24 часа. В нашей практике что одна, что две стерилизации с применением скороварки или мультиварки под давлением не влияли на конечный результат. Детали в разделе Эксперименты в процессе гровинга.
Когда банки остынут до комнатной температуры, переходи к